Садржај
- Боља визуализација
- Идентификација и класификација
- Детекција изводљивости
- Идентификација ћелијских структура
Микробиолози проучавају карактеристике микроорганизама, као што су алге, бактерије, протозое, гљивице и вируси, користећи микроскоп. Иако се неки организми, као што су протозое и ћелије квасца, лако могу видети кроз стакалца, бактеријске ћелије захтевају бојење. Научници су развили бројне методе, као што је техника бојења по Граму, бојење киселином и флуоресцентно бојење за побољшање визуализације бактеријских ћелија и станичних структура. Користећи такве методе бојења, могуће је идентификовати структурне карактеристике које помажу у класификацији бактерија.
Боља визуализација
Бактеријски организми су толико мали да је већина њих видљива само под микроскопом са силом увећања од 1000 пута. Међутим, једноставно проширење не обезбеђује довољан степен јасноће, тако да бактерије треба да буду обојене пре посматрања како би се обезбедила јасноћа потребна за визуализацију.
Идентификација и класификација
Бојење бактерија за разликовање типова бактерија познато је као диференцијално бојење. Грамно обојење је диференцијално бојење које разликује бактерије у функцији садржаја ћелијског зида. У овој методи, бактеријске ћелије реагују са кристалном љубичастом бојом да постану љубичасте. Додавањем средства за обезбојење неке бактеријске ћелије губе боју, док друге не. Додавањем сафранин боје обојене ћелије добијају црвено бојење, док бактеријске ћелије које не губе боју остају љубичасте. Црвене ћелије се називају грам-негативни организми, а оне које не постају црвене се класифицирају као грам-позитивни организми. Техника бојења Грамом пружа брзу методу за почетну идентификацију бактерија укључених у инфекције. Исто тако, процес бојења отпорног на киселине помаже да се специфично идентификују организми који припадају класи бактерија названих микобактерија, као што је Мицобацтериум туберцулосис.
Детекција изводљивости
У узорцима бактеријске културе често је важно детектовати присуство живих бактеријских ћелија. Методе као што је флуоресцентно бојење помажу да се идентификује да ли су ћелије културе виталне или не. Живе бактерије имају способност да конвертују тетразолијум хлорид 5-цијано-2,3-дитолил (ЦТЦ) у боју која показује црвену флуоресценцију. Према томе, када културе ЦТЦ боје емитују ове флуоресценције, то указује на присуство виталних бактерија. Пропидијум јодид је бојење које делује само на неживим ћелијама које имају оштећене мембране и стога је корисно у идентификацији мртвих бактеријских ћелија.
Идентификација ћелијских структура
Бојање пружа јасан метод визуелизације за различите ћелијске структуре. На пример, Феулген метод бојења омогућава идентификацију нуклеуса унутар бактеријских ћелија, док је Алберт бојење корисно у визуелизацији метахроматских гранула. Исто тако, техника импрегнације сребром омогућава идентификацију спирохета. Жабице су лако видети када су обојене бојом Риуа. Малохитно зелено бојење помаже да се идентификују бактеријске споре.
