Садржај
Микробиолози проучавају карактеристике микроорганизама, као што су алге, бактерије, протозое, гљивице и вируси, помоћу микроскопа. Иако је неке организме, попут протозоа и ћелија квасца, лако видети кроз дијапозитиве, бактеријским ћелијама је потребно бојење. Научници су развили неколико метода, попут технике бојења по Граму, бојења отпорног на киселине и флуоресцентног бојења како би побољшали визуализацију бактеријских ћелија и ћелијских структура. Коришћењем таквих метода бојења могуће је идентификовати структурне карактеристике које помажу у класификацији бактерија.
Боље гледање
Бактеријски организми су толико мали да је већина њих видљива само под микроскопом са снагом увећања од 1000 пута. Међутим, једноставно повећање величине не пружа довољан степен јасноће, тако да бактерије морају бити обојене пре посматрања како би се обезбедила јасноћа неопходна за визуелизацију.
Идентификација и класификација
Бојење бактерија ради разликовања врста бактерија познато је као диференцијално бојење. Грамова мрља је диференцијална мрља која разликује бактерије у зависности од садржаја ћелијског зида. У овој методи, бактеријске ћелије реагују са кристално љубичастом бојом да би прешле у љубичасту. Додавањем средства за избељивање неке бактеријске ћелије губе боју, док друге не. Додавањем сафранинске боје, обојене ћелије постају црвене, док бактеријске ћелије које не губе боју остају љубичасте. Ћелије које постају црвене називају се грам-негативни организми, а ћелије које не постају црвене класификују се као грам-позитивни организми. Техника бојења по Граму пружа брзу методу за почетну идентификацију бактерија укључених у инфекције. Слично томе, поступак бојења отпоран на киселине помаже да се специфично идентификују организми који припадају класи бактерија званим микобактерије, као што је Мицобацтериум туберцулосис.
Откривање изводљивости
У узорцима бактеријских култура често је важно открити присуство живих бактеријских ћелија. Методе попут флуоресцентног бојења помажу да се утврди да ли су ћелије за узгој одрживе или не. Живе бактерије имају способност да претворе тетразолијум 5-цијано-2,3-дитолил хлорид (ЦТЦ) у боју која показује црвену флуоресценцију. Стога, када културе обојене у ЦТЦ емитују ове флуоресценције, то указује на присуство одрживих бактерија. Пропидијум јодид је мрља која делује само на неживе ћелије које имају оштећене мембране и стога је корисна у идентификовању мртвих ћелија бактерија.
Идентификација ћелијских структура
Бојење пружа метод јасне визуелизације различитих ћелијских структура. На пример, Феулген метода бојења омогућава идентификацију језгра унутар бактеријских ћелија, док је Алберт бојење корисно за визуелизацију метахроматских гранула. Слично томе, техника импрегнације сребром омогућава идентификацију спирохета. Бичеви су лако уочљиви када су обојени Риуовом бојом. Малахитно зелено бојење помаже у идентификовању спора бактерија.
