Садржај
Течна хроматографија високих перформанси (ХПЛЦ) је алат који се користи за одвајање супстанци од смеше. Одвајање и идентификација одређених хемикалија јавља се углавном у хроматографској колони система. Многи типови колона су доступни за ЦЛАЕ, а сваки се користи за одређену врсту анализе. Колона Ц18 је најјача неполарна генерално коришћена. Након континуиране употребе током дужег временског периода, проток растварача кроз њега се смањује и време анализе се повећава. Други узрок смањења времена анализе је имати узорке који остављају мале количине хемикалија у материјалу колоне, смањујући могућност њиховог раздвајања. Обнављање његове површине може се извршити третирањем материјала низом специфичних растварача како би се очистио од преосталих узорака и ревитализовао носећи материјал.
Корак 1
Уклоните колону Ц18 из смера протока и поставите је у супротном смеру. Враћање растварача кроз њега ублажиће ефекат акумулације који се јавља током времена. Мора се пазити да се на крају колоне не остави превише материјала. Неке фабрике користе већу мрежу на врху, тако да када проток промени смер, мрежа се налази у положају испод. Овај метод рестаурације назива се преокрет протока. Да бисте спречили да накупљање тече ка системском детектору и евентуално изазива препреку, дозволите му да функционише без повезаног детектора и усмерите ток из колоне на одлагање.
Корак 2
Поставите пролазну цев за растварач у низ растварача да бисте елуирали било које једињење задржано у колони у супротном смеру. Ови растварачи се разликују по својим хидрофилним карактеристикама. Њиховом променом елуираћете једињења подједнако разнолике хидрофилне природе. Узастопно користите 50 мл сваког од следећих растварача: вода (ако користите пуфер), метанол, изопропанол, дихлорометан, хексан, дихлорометан и изопропанол.
3. корак
Вратите колону у исправном смеру и пустите да растварач протиче кроз њу. Исперите га пре него што наставите са најмање 75 мл. Тестирајте га узорком који сте користили када је био нов и проверите резултате. Обратите пажњу када достигнете максималне тачке задржавања и укупно време анализе. Степен у којем се ови атрибути подударају са почетним тестом док је још увек био нов показаће степен у коме је колона враћена. Ако резултати нису задовољавајући, замените колону новом и баците стару.
