Садржај

• Упутства
• Опоравак колоне
• Како
• Обавештење
• Шта ти треба

Текућа хроматографија високих перформанси (ХПЛЦ) је уобичајена метода лабораторијске анализе у којој се узорак раздваја на своје хемијске компоненте како пролази кроз колону. Ова колона се пуни порозним материјалом, типично силика гелом. Стандардна колона реверзне фазе, као што је Ц8, понекад се може зачеплити или контаминирати. Ове колоне се могу добити једноставним техникама.

Упутства

Прави растварач може повратити прљаву колону (Јупитеримагес / ликуидлибрари / Гетти Имагес)

Опоравак колоне

1. Искључите колону и преокрените њен положај, тако да мобилна фаза сада улази кроз оно што је нормално излаз колоне. Причврстите утичницу на други крај колоне (која је била оригинални унос) и пустите да се испусти у пражњење.

2. Пумпајте серију растварача у редоследу смањења поларитета. Препоручена основна серија је да се почне са метанолом, затим пређе на ацетонитрил, затим на ацетонитрил / изопропанол (75:25), изопропанол, метилен хлорид и хексан. Ако је мобилна фаза која је била у колони апсорбентна, препоручује се пролаз са водом пре у метанолу. Довољан је проток од једног до два милилитра у минути и потребно је пумпати приближно десет запреминских колона сваког растварача. Колона за запремину је унутрашњи простор колоне и израчунава се помоћу (0,7 к пи к (ДИ / 2) ^ 2 к Л), где је ДИ унутрашњи пречник колоне и Л је дужина.

   
   

3. Пумарајте још десет запремина изопропанола кроз колону да бисте га припремили за употребу са оригиналном мобилном фазом. Ако је оригинална мобилна фаза обложена, такође пумпајте воду кроз колону након изопропанола, пре него што се вратите у оригиналну мобилну фазу.

4. Искључите колону, поставите је уназад и поново укључите тако да буде у свом првобитном положају (тако да покретна фаза улази у десну страну колоне). Поново спојите излаз звучника на детектор.

Како

• Ако овај процес не очисти темељно колону, може се користити 50:50 смеша диметил сулфоксида (ДМСО) и диметил формамида (ДМФ). Остаци протеина и металних јона могу захтевати друге типове растварача, као што су реагенси који штеде јон или раствор етилен диамин тетра сирћетне киселине (ЕДТА).

Обавештење

• Код неких апарата, кичма ће имати грубо метално сито као улаз. У том случају, враћање колоне ће омогућити стационарној фази да напусти колону и то се не препоручује. Ако нисте сигурни, посаветујте се са продавцем.
• Растварач који се користи у овом процесу је потенцијално токсичан када се прогута и удише. При руковању користите нормалне лабораторијске мере предострожности.

Шта ти треба

• ХПЛЦ уређај
• Вода
• Метанол
• Ацетонитриле
• Изопропанол
• Метилен хлорид
• Хексан